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6种新冠检测方法 ,它们是如何检出病毒的?
时间 :2021-01-19 00:40 点击次数 :

1. 直接检测病毒本身

2. 可以检测病毒表面的抗原 ,也可以检测病毒的核酸 。

检测认了为了抵抗病毒产生的抗体 :

通常情况下 ,抗原检测对实验室条件要求不高 ,主要适用于基层医院进行的大规模筛查;抗体检测操作方便 ,10-15分钟即可获取检测结果 。而核酸检测多实验室条件 、间歇人员 、仪器要求高 ,但结果页最为敏感和准确 。

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截至目前 ,国家药品监督管理局共批准新冠病毒检测试剂15个 ,其中核酸检测试剂10个 ,抗体检测试剂5个 ,没有批准病毒抗原的相关检测 。

下面 ,我们针对新冠病毒的核酸检测和抗体检测已获批的方法进行介绍 。
 

目前已批准的10个新冠病毒核酸检测试剂 ,有8个采用的都是荧光PCR法 ,剩余的检测方法分别是联合探针锚定聚合测序法和恒温扩增芯片法 。

1.荧光PCR法

PCR法指的是聚合酶链式反应 ,能将微量的DNA大幅增加 。用于检测新冠病毒时 ,由于新冠病毒是RNA病毒 ,需要先将病毒RNA逆转录为DNA ,再进行PCR检测 。

 

荧光PCR检测的原理为 ,随着PCR的进行 ,反应产物不断累积 ,荧光信号强度也等比例增加 。最后通过荧光强度变化监测产物量的变化 ,从而得到一条荧光扩增曲线图 。

这是目前新冠病毒核酸检测最常用的方法 。但下列因素可能导致检测结果出现误差 :

保存不当或未及时送检 :RNA病毒很容易降解 ,因此 ,获得患者样本后 ,需要规范地保存 ,并尽快进行检测 。否则 ,很可能导致检测结果不准确 。

结果解读错误 :目前批准的检测产品都是根据新型冠状病毒基因组中开放读码框1a/b 、包膜蛋白和核衣壳蛋白进行选择 。但不同产品的检测引物 、探针设计存在不同 ,有单靶区段 、双靶区段 、三靶区段的检测和判读差别 。因此 ,如果没有严格按照不同的说明书进行判读 ,有可能导致结果判断错误 。

2.联合探针锚定聚合测序法

这种检测主要是用专门的仪器检测测序载片上DNA纳米球携带的基因序列 。

这种检测的灵敏度高 ,不容易漏诊 ,但结果也容易受多种因素的影响而不准 ,包括 :

未及时检测样本 :和荧光PCR法一样 ,如果没有规范保存和尽快检测 ,结果可能不准 。

检测场所的室温过高 :这也会影响检测结果的准确性 。不同的检测仪器 、试剂盒也可能对结果造成影响 。

3.恒温扩增芯片法

基因芯片检测是传统的病毒学诊断方法之一 ,检测原理是基于核酸之间的互补结合特性开发的一种检测方式 ,能够用于定性或定量测量存在于生物体内的核酸 。和PCR相比 ,基因芯片准确率高 ,时间更短 ,但价格也更为昂贵 、检测通量(单位时间内所能产生的数据量)相对更低 。
此次获批的这个恒温芯片 ,能对新冠病毒在内的6种呼吸道病毒进行检测 。1.5小时内便可获得结果 ,

和PCR相比 ,基因芯片准确率高 ,时间更短 ,但价格也更为昂贵 、且检测通量(单位时间内所能产生的数据量)相对更低 。

4.病毒抗体检测

抗体检测试剂是检测血清中由病毒进入人体后刺激人体产生的IgM或IgG抗体 ,IgM抗体出现较早 ,IgG抗体出现较晚 。

目前已获批的5个新冠病毒抗体检测试剂 ,分别采用的是胶体金法和磁微粒化学发光法 。

5.胶体金法

胶体金法是用胶体金试纸进行检测 ,也就是目前常说的快速检测试纸 。

 

这种试纸经过特殊标记 ,上面有孔 ,用于滴入受检者的血清样本 。胶体金试纸上面有2条线 ,一条叫做检测线 ,另一条叫做质量控制线 ,如果两条线都显色 ,代表阳性;只有质控线显色 ,代表阴性;这两种情况之外都属于无效结果 。

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这种检查一般在10~15分钟左右 ,就可以得出检测结果 。

这种检测方法很方便 ,出结果的速度也很快 。但主要的不足在于 ,检测通量较低 ,有一定的误判率(主要是受抗体质量影响) 。

而且 ,胶体金法检测的新冠病毒抗体是IgM抗体 。IgM产生的时间要晚于病毒复制的时间 ,所以检测的时间窗口比核酸检测窄 。

6.磁微粒化学发光法

化学发光法是一种高度敏感的免疫检测 ,凡具有抗原性的物质都可以用这种方法测定 。
磁微粒化学发光法是在化学发光检测的基础上 ,加用了磁性纳米粒子 ,使检测具有了更高的灵敏度和更快的检测速度 。
不过 ,磁微粒化学发光法选择性差 ,会对一个系列的化合物做出反应 ,而非特定的某一化合物 ,因此 ,准确性上相对不够好 。而且 ,环境对检测的影响比较大 ,容易导致误差 。

新冠核酸检测vs抗体检测 ,怎么选?

目前 ,指南推荐能用来确诊新冠病毒感染的仍然只有核酸检测 。

对于新冠病毒核酸检测阴性的疑似病例 ,可以采用抗体检测作为补充检测指标 。对于新冠病毒核酸检测的疑似病例 ,也可以用抗体检测来协同使用 。

此外 ,抗体检测还可以发挥安全评估和疗效监测作用 。例如 ,抗体检测可作为恢复期患者血浆治疗的监测评价 ,也可以用在疫苗研发和效价测定中 。

 

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